เรื่องการเลือกใช้ตัวติดตามระหว่าง taqman กับ SYBR น่ะค่ะ
เท่าที่ทราบก็คือ
SYBR เป็น non specific chemistry , ถูก , สัญญาณชัดเจน แต่จับกับ dsDNA ทุกชนิด
ส่วนเจ้า taqman ที่เป็น hydrolysis probe มันก็จะมีความจำเพาะกว่า แต่ก็ต้องทำปฏิกิรกยาที่อุณหภูมิต่ำ และpolymerase ที่ใช้ต้องมี 5 -> 3exonuclease
แล้วเหตุผลที่แน่ชัดว่ายังคงมีการเลือกใช้ SYBR คืออะไรหรือคะ หรือแค่เพียงว่ายุ่งยากน้อยกว่า ไม่ต้องมาออกแบบไพรเมอร์ และออกแบบโพรบให้จำเพาะอีกที (หรือโพรบนี่ซื้อเอาคะ)
แล้ว SYBR นี่เหมาะกับความยาวtarget เท่าไหร่หรือคะ?
ขอบคุณมากค่ะ
สอบถามเกี่ยวกับ real time-PCR หน่อยค่ะ
เท่าที่ทราบก็คือ
SYBR เป็น non specific chemistry , ถูก , สัญญาณชัดเจน แต่จับกับ dsDNA ทุกชนิด
ส่วนเจ้า taqman ที่เป็น hydrolysis probe มันก็จะมีความจำเพาะกว่า แต่ก็ต้องทำปฏิกิรกยาที่อุณหภูมิต่ำ และpolymerase ที่ใช้ต้องมี 5 -> 3exonuclease
แล้วเหตุผลที่แน่ชัดว่ายังคงมีการเลือกใช้ SYBR คืออะไรหรือคะ หรือแค่เพียงว่ายุ่งยากน้อยกว่า ไม่ต้องมาออกแบบไพรเมอร์ และออกแบบโพรบให้จำเพาะอีกที (หรือโพรบนี่ซื้อเอาคะ)
แล้ว SYBR นี่เหมาะกับความยาวtarget เท่าไหร่หรือคะ?
ขอบคุณมากค่ะ